检验原理
本试剂盒采用间接酶联免疫吸附实验技术,检测人血清中的EBV VCA IgA抗体。将重组的EBV VCA抗原包被聚苯乙烯反应板微孔,将待测血清样本加入到包被抗原孔温育反应,样本中的EBV VCA IgA抗体与抗原结合,再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgA作为第二抗体,即可在固相上形成EBV VCA-EBV VCA IgA-抗人IgA-HRP复合物,洗去未结合物,加入显色剂即可呈色,呈色深浅与EBV VCA IgA抗体的水平成正比,可通过酶标分析仪定性判断结果。
主要组成成份
序号 | 名称 | 规格 | 数量 | 主要成份 |
1 | 包被板 | 96人份/块 | 1 | 包被重组EBV VCA抗原 |
2 | 阳性参考品 | 0.5mL/瓶 | 1 | 0.01M PBS,CS,NaN3,EBV VCA-IgA AbPS |
3 | 阴性参考品 | 0.5mL/瓶 | 1 | 0.01M PBS,CS,NaN3,EBV VCA-IgA AbNS |
4 | 酶结合物 | 11.0mL/瓶 | 1 | 鼠抗人IgA-HRP |
5 | 样本稀释液 | 11.0mL/瓶 | 1 | 0.005M PBST,CS,NaN3 |
6 | 浓缩洗涤液(20×) | 20.0mL/瓶 | 1 | 0.2M PBST,C9H9O2HgNaS |
7 | 显色剂A | 6.8mL/瓶 | 1 | CH4N2O3 |
8 | 显色剂B | 6.8mL/瓶 | 1 | TMB |
9 | 终止液 | 6.8mL/瓶 | 1 | 2.0M H2SO4 |
10 | 干燥剂 | 0.5g/包 | 2 | |
11 | 封板膜 | 3 |
试验所需而未提供的材料:
移液器、吸头及一次性试管、计时器、洗涤瓶或洗板机、酶标仪、蒸馏水或去离子水。
检测步骤
1. 设置空白对照、阳性对照各一孔和阴性对照两孔,空白对照加入100μl/孔样本稀释液,阴性对照、阳性对照孔分别加入100μl/孔阴、阳性参考品。
2. 加样:样品孔每孔加入100μl样品稀释液,再加入5μl血清样本,充分混匀(在微量振荡器上振荡20秒),置37℃温育30分钟。
3. 取出温育后的反应板,用洗涤液洗板三次(手动,每次静置1分钟)或五次(洗板机自动冲洗),拍干。
4. 每孔加入酶结合物100μl,然后将反应板置37℃温育20分钟。
5. 取出反应板按步骤3洗板操作,拍干。
6. 每孔加入底物A液50μl,再加入底物B液50μl,在微量振荡器上振荡混匀,37℃温育10分钟。
7. 加终止液50μl/孔,于450nm波长测OD值。